GPRC5A在喉癌发生中的生物学作用及机制研究
Biological role and mechanism of GPRC5A in the development of laryngeal carcinoma
摘要目的 探讨 G 蛋白偶联受体 C 家族 5 A(Gprotein-coupled receptor family C,member 5,group A,GPRC5A)在喉癌组织中的表达特征,分析其在喉癌发展进程中的作用及机制.方法 选取河北医科大学第二医院收治的32例经病理检查确定为喉鳞状细胞癌患者的喉癌组织及癌旁组织,采用免疫组织化学方法检测GPRC5A在喉癌组织及癌旁组织中的表达,并分析其表达特征与患者临床资料的相关性.采用定量聚合酶链式反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)方法对GPRC5A在喉癌组织与癌旁组织的表达进行组织水平的验证,在人支气管上皮细胞系BEAS-2B、喉癌细胞系TU686及下咽癌细胞系Fadu中进行细胞水平的验证.构建GPRC5A过表达质粒p-GPRC5A,转染至喉癌TU686细胞中采用cell counting kit 8、Transwell方法检测GPRC5A基因过表达对喉癌TU686细胞增殖、侵袭及迁移的影响.Western blot检测GPRC5A基因过表达对细胞凋亡相关蛋白表达的影响.Western blot验证GPRC5A基因过表达对表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)/STAT3(epidermal growth factor receptor/signal transducer and activator of transcription 3)通路的影响.结果 免疫组织化学结果表明,GPRC5A在喉癌组织中的阳性表达率显著低于癌旁组织(x2=14.190,P<0.001).GPRC5A在不同肿瘤分期、淋巴结转移、分化程度喉癌组织中表达差异无统计学意义(P>0.05).GPRC5A在喉癌组中的表达显著低于癌旁组(t=3.175,P=0.003).GPRC5A在喉癌TU686和Fadu细胞中表达为 BEAS-2B 的(0.73±0.08)和(0.78±0.04)倍,差异有统计学意义(F=9.060,P=0.015);CCK8 结果表明,48 h后 p-GPRC5A 组的 OD 值为 0.76±0.03,显著低于 NC 组 1.20±0.01 和对照组 1.30±0.08(F=69.970,P<0.001);Transwell实验表明,p-GPRC5A组细胞迁移的细胞数为138.70±10.97,显著低于对照组251.3±16.9和NC组247.7±17.5(F=5 731.100,P<0.001).p-GPRC5A 组细胞侵袭的细胞数为 113.00±10.21,显著低于对照组193.3±010.02 和 NC组 190.00±7.90(F=8 894.100,P<0.001).Western blot 结果表明,与对照组相比,Caspase3蛋白在p-GPRC5A组表达显著升高(F=78.880,P<0.001),Bcl-2蛋白在p-GPRC5A组的表达显著降低(F=125.820,P<0.001).EGFR 和 p-STAT3 蛋白在 p-GPRC5A 组的表达显著降低(F=27.573,P=0.001;F=60.614,P<0.001).结论 GPRC5A在喉癌组织及细胞系中低表达.GPRC5A基因过表达可抑制喉癌细胞增殖,迁移和侵袭,促进细胞凋亡发生,并抑制EGFR/STAT3通路的激活.
更多相关知识
- 浏览5
- 被引0
- 下载1

相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文