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HPLC-MS/MS检测血清Hcy谱的方法建立及在CKD中的临床应用

Establishment of HPLC-MS/MS method for serum homocysteine profile detection and its clinical application in chronic kidney disease

摘要目的 建立高效液相色谱串联质谱(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)定量检测血清同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)谱的检测方法及在慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)中的临床应用.方法 选取2024年1月—2025年1月初次就诊于河北医科大学第二医院的临床诊断为CKD的患者308例(CKD组)和健康体检人群103例(CON组)为研究对象,检测2组人群血清Hcy、半胱氨酸(cysteine,Cys)及甲硫氨酸(methionine,Met)水平.检测采用HPLC-MS/MS系统,使用色谱柱[(2.1×100.0)mm,2.1 μm]分离,柱温40℃,流动相为0.2%甲酸水溶液和纯乙腈,梯度洗脱,并应用线性、定量下限、精密度、正确度、基质效应、样本稳定性、残留、干扰及稀释一致性等参数进行方法的性能验证.结果 共411例CON人群及CKD患者入选该研究,CON组103例,年龄(50.01±12.41)岁,男性58例,女性45例,CKD组308例,年龄(54.44±15.38)岁,男性172例,女性136例;Hcy、Cys、Met的线性范围分别是1~100、5~500、2~200 μmol/L;定量下限分别是1、5、2 μmol/L;批内、批间变异系数(coefficient of variation,CV)均<±15%;回收率分别是97%~105%、93%~111%、102%~109%;1∶1混合样本的Hcy、Cys、Met测定值比血清基质样本及纯溶液样本测定值的均值低1.45%、3.52%、2.18%;血清Hcy、Cys、Met的浓度含量在7 d内以及样本处理后24 h内与首次测定结果的相对偏差均<±15%;该方法残留较少,且不受溶血、黄疸和脂血的干扰;稀释5倍、10倍和20倍血清样品中的Hcy、Cys及Met测定值CV均小于15%,且回收率均在85%~115%以内;与CON组相比,CKD组血清Hcy及Cys水平显著升高(P<0.001).结论 本研究建立的血清Hcy谱HPLC-MS/MS检测方法性能良好,可用于检测CKD患者血清Hcy谱的含量.

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DOI 10.3969/j.issn.1007-3205.2026.01.015
发布时间 2026-03-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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