萝卜硫素调控AMPK/SIRT1通路对坏死性小肠结肠炎新生大鼠肠道炎症及肠道菌群的影响
Effect of Sulforaphane on Intestinal Inflammation and Gut Microbiota in Neonatal Rats with Necrotizing Enterocolitis by Adjusting AMPK/SIRT1 Pathway
摘要目的:探讨萝卜硫素(SFN)调控腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子 1(SIRT1)通路对坏死性小肠结肠炎(NEC)新生大鼠肠道炎症及肠道菌群的影响.方法:将新生大鼠随机分为正常组(NC组)、NEC 模型组(NEC 组)、低剂量 SFN 组(L-SFN 组)、高剂量 SFN 组(H-SFN组)、高剂量SFN+AMPK抑制剂BML-275 组(H-SFN+BML-275 组),除正常组外,其余均建立 NEC 模型.ELISA检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6 含量;HE 染色观察回盲部肠组织病理变化;TUNEL染色检测回盲部肠组织细胞的凋亡;Western blot 检测回盲部肠组织中 p-AMPK、AMPK、SIRT1 的表达水平;选择性培养基分析粪便中肠道菌群乳酸杆菌、双歧杆菌、大肠杆菌的变化.结果:与NC组相比,NEC组新生大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6 含量增多,回盲部肠组织病理损伤评分、细胞凋亡荧光强度升高,而p-AMPK/AMPK、SIRT1 的表达减少,粪便中乳酸杆菌、双歧杆菌减少,大肠杆菌增多(P<0.05);与NEC组相比,L-SFN组、H-SFN组新生大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6 含量减少,回盲部肠组织病理损伤评分、细胞凋亡荧光强度降低,而 p-AMPK/AMPK、SIRT1 的表达增多,粪便中乳酸杆菌、双歧杆菌增多,大肠杆菌减少(P<0.05);与 H-SFN 组相比,H-SFN+BML-275组新生大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6 含量增多,回盲部肠组织病理损伤评分、细胞凋亡荧光强度升高,而p-AMPK/AMPK、SIRT1 的表达减少,粪便中乳酸杆菌、双歧杆菌减少,大肠杆菌增多(P<0.05).结论:SFN可能通过激活 AMPK/SIRT1 通路,从而减轻 NEC 新生大鼠肠道炎症反应,改善肠道菌群的构成,最终减缓NEC疾病进程.
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