miR-32-5p靶向调控E2F7对脑胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响
Effect of miR-32-5p on Malignant Biological Behavior of Glioma Cells by Targeting Regulation of E2F7
摘要目的:探讨微小RNA-32-5p(miR-32-5p)靶向调控E2F转录因子7(E2F7)对脑胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响.方法:选取2023 年3 月至2024 年8 月于本院手术治疗的 45 例脑胶质瘤患者癌组织及癌旁组织,通过qRT-PCR 实验检测脑胶质瘤组织及其癌旁组织中 miR-32-5p 和 E2F7 mRNA表达量;体外培养脑胶质瘤细胞系U87MG,将U87MG分为NC组、miR-NC组、miR-32-5p mimic组、sh-NC组、sh-E2F7 组、miR-32-5p mimic+pcDNA-NC组、miR-32-5p mimic+pcDNA-E2F7 组,分别采用克隆形成实验、流式细胞术、划痕愈合实验、Transwell 实验检测各组 U87MG 细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力;qRT-PCR 检测各组 U87MG 细胞中 miR-32-5p 和 E2F7 表达量;Western blot 检测各组U87MG细胞中E2F7、细胞周期蛋白(Cyclin D1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、半胱天冬酶(Caspase)3、Bcl-2 相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶(MMP)2、基质金属蛋白酶抑制因子(TIMP)1 蛋白表达量;双荧光素酶报告基因实验验证 miR-32-5p 和 E2F7 靶向关系.结果:与癌旁组织相比,癌组织中 miR-32-5p表达量明显降低,E2F7 mRNA表达量明显升高(P<0.05);与 NC 组相比,miR-NC 组和 sh-NC 组各指标无明显变化(P>0.05);与miR-NC组或sh-NC组相比,miR-32-5p mimic组或sh-E2F7 组U87MG细胞增殖、迁移和侵袭能力降低,E2F7 mRNA 表达量及 E2F7、Cyclin D1、PCNA、MMP-2 蛋白表达量明显降低,细胞凋亡率、miR-32-5p表达量及Caspase-3、Bax、TIMP-1 蛋白表达量明显上升(P<0.05);与miR-32-5p mimic+pcDNA-NC组相比,miR-32-5p mimic+pcDNA-E2F7 组U87MG细胞增殖、迁移和侵袭能力升高,E2F7 mRNA表达量及E2F7、Cyclin D1、PCNA、MMP-2 蛋白表达量明显升高,细胞凋亡率、miR-32-5p 表达量及 Caspase-3、Bax、TIMP-1 蛋白表达量明显降低(P<0.05);双荧光素酶实验证明miR-32-5p和E2F7 存在靶向关系(P<0.05).结论:miR-32-5p 可通过靶向下调 E2F7 抑制脑胶质瘤细胞恶性生物学行为.
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