换一批miR-4286调控FOXO4对肺癌细胞增殖和转移的影响
Effects of miR 4286 on the proliferation and metastasis of lung cancer cells by regulating FOXO4
摘要目的 探讨微小RNA-4286(miR-4286)对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测人肺癌细胞系A549和人正常支气管上皮细胞系HBE中miR-4286和FOXO4 mRNA的表达水平.转染miR-4286抑制剂或FOXO4过表达载体至肺癌细胞A549,构建miR-4286表达抑制或过表达FOXO4的肺癌细胞A549.四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞存活率、Transwell法检测细胞的迁移和侵袭能力、蛋白印迹法(Western blot)检测细胞周期蛋白1(CyclinD1)、P21、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达.双荧光素酶报告基因实验验证miR-4286与FOXO4靶向关系.结果 与正常支气管上皮细胞组比较,肺癌细胞中miR-4286表达显著升高(P<0.05),FOXO4 mRNA表达显著降低(P<0.05).抑制miR-4286表达或过表达FOXO4后,肺癌细胞存活率、迁移和侵袭细胞数、CyclinD1蛋白、MMP-2蛋白、MMP-9蛋白表达显著降低(P<0.05),FOXO4 mRNA、P21蛋白表达显著升高(P<0.05).miR-4286在肺癌细胞中靶向负调控FOXO4表达.抑制FOXO4表达可逆转干扰miR-4286对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.结论 抑制miR-4286表达通过靶向上调FOXO4表达抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭.
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