lncRNA LINC00240通过靶向miR-656-3p调控胶质瘤细胞发生发展的分子机制研究
Molecular mechanism of lncRNA LINC00240 in regulating the pathogenesis and development of glioma cells by targeting miR-656-3p
摘要目的 探讨LINC00240调控胶质瘤细胞发生发展的分子机制.方法 培养正常人类神经胶质细胞HEB和胶质瘤细胞系LN18、SW1088、Hs683,将胶质瘤细胞LN18随机分为si-NC组、si-LINC00240组、pcDNA-NC组、pcDNA-LINC00240组、miR-NC组、miR-656-3p组si-LINC00240+anti-miR-NC组、si-LINC00240+anti-miR-656-3p组.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LINC00240、miR-656-3p的表达水平;蛋白质印迹(Western blot)法检测磷酸化p65(p-p65)、磷酸化核因子kappaB抑制蛋白α(p-IкBα)表达;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验检测LINC00240和miR-656-3p的靶向关系.结果 与正常人类神经胶质细胞HEB相比,胶质瘤细胞系LN18、SW1088、Hs683中LINC00240表达水平升高,miR-656-3p表达水平降低(P<0.05).LINC00240低表达或miR-656-3p高表达,胶质瘤细胞LN18活性降低,LN18细胞凋亡率升高(P<0.05).LINC00240靶向miR-656-3p;LINC00240低表达,p-p65、p-IкBα 表达水平降低(P<0.05).低表达miR-656-3p可以逆转LINC00240低表达对LN18细胞增殖、凋亡的影响.结论 抑制LINC00240表达可能通过上调miR-656-3p抑制NF-κB信号通路,从而抑制胶质瘤细胞增殖,促进细胞凋亡.
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