miR-671-5p调控TIPE2对肺炎链球菌诱导肺泡上皮细胞凋亡的影响
MiR-671-5p mediates Streptococcus pneumoniae-induced apoptosis of alveolar epithelial cells by regulating TIPE2
摘要目的 探讨miR-671-5p调控肿瘤坏死因子α诱导蛋白8-2(TIPE2)对肺炎链球菌(SP)诱导的肺泡上皮细胞(HPAEpiC)凋亡的影响.方法 将HPAEpiC细胞分为Ctrl组、SP组、inhibitor NC组、miR-671-5p inhibitor组、miR-671-5p inhibitor+si-NC组、miR-671-5p inhibitor+si-TIPE2组,Ctrl组为未经任何处理的HPAEpiC细胞,SP组为未转染只用SP处理24 h的HPAEpiC细胞,其他组均转染对应物48 h后,再加入SP处理24 h.qRT-PCR检测miR-671-5p表达;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA试剂盒检测细胞上清中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)水平;western blot检测细胞中TIPE2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测miR-671-5p与TIPE2的关系.结果 与Ctrl组比较,SP组细胞中miR-671-5p表达、细胞凋亡率、IL-6、TNF-α、IL-1β水平、Bax、caspase-3蛋白表达升高,OD450值、TIPE2、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);与inhibitor NC组比较,miR-671-5p inhibitor组对应指标变化趋势与上述相反(P<0.05);沉默TIPE2减弱了下调miR-671-5p对SP诱导的肺泡上皮细胞凋亡及炎性反应的抑制作用.结论 下调miR-671-5p可通过靶向上调TIPE2抑制SP诱导的肺泡上皮细胞凋亡.
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