miR-146a靶向TLR4对糖尿病所致足细胞能量代谢障碍的保护作用
Protective effect of miR-146a on diabetes-induced impair in energy metabolism of podocytesviatargeting toll-like receptor 4
摘要目的 探讨糖尿病肾病足细胞(podocyte)能量代谢的调控机制.方法 购买人源肾足细胞,高糖诱导建立糖尿病体外模型,转染miR-146a mimic或pcDNA3.1-TLR4 及其阴性对照物.qRT-PCR检测miR-146a与TLR4 的表达.通过检测细胞外酸化率(ECAR)、检测糖酵解关键酶HK2 的mRNA评估足细胞的糖酵解能力;通过JC-1 荧光染色与ATP试剂盒检测了线粒体膜电位的变化以及ATP 的含量.Starbase网站(https://starbase.sysu.edu.cn/)预测、双荧光素酶报告实验检测miR-146a与TLR4 的靶向结合.结果 高糖诱导的足细胞中miR-146a表达下调,TLR4表达上调,糖酵解能力下降,细胞膜电位下降,ATP产生减少;上调miR-146a的表达可以改善这种变化,而同时上调TLR4 的表达则抑制了高表达miR-146a的改善作用.miR-146a靶向抑制TLR4 的表达.结论 糖尿病肾病足细胞中miR-146a低表达,促进了TLR4 的表达,抑制了足细胞的糖酵解、膜电位及ATP 的含量,最终导致足细胞的能量代谢障碍.
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