miR-28-5p靶向BECN1对OCI-LY7细胞凋亡及自噬过程的调控作用
Regulatory effect of miR-28-5p on apoptosis and autophagy of OCI-LY7 cells by targeting BECN1
摘要目的 探讨miR-28-5p靶向BECN1 在OCI-LY7 细胞凋亡及自噬过程中的作用及机制.方法 通过TUNEL荧光染色、Western blot实验明确miR-28-5p及姜黄素在OCI-LY7 细胞凋亡及自噬过程的作用,经在线预测并进一步通过双荧光素酶报告基因检测明确miR-28-5p和BECN1 的靶向关系.结果 TUNEL染色和caspase-3 蛋白水平检测:与对照组比较,姜黄素明显增加凋亡细胞百分比并表达裂解蛋白caspase-3(P<0.05).相比姜黄素单独作用,细胞凋亡被miR-28-5p显著减弱抑制(P<0.05).与对照组比较,姜黄素组beclin1 和LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值显著降低、P62 蛋白表达明显升高(P<0.05);与姜黄素组比较,姜黄素+miR-28-5p 抑制剂组 beclin1 表达和 LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值明显升高、P62 蛋白表达明显降低(P<0.05).通过在线数据库预测:miR-28-5p与BECN1 存在靶向的关系;双荧光素酶报告基因实验显示:与阴性对照组比较,miR-28-5p模拟物显著降低BECN1-wt组的荧光素酶活性,但miR-28-5p模拟物不影响BECN1-mut组的荧光素酶活性.结论 miR-28-5p介导姜黄素促OCI-LY7 细胞凋亡作用.BECN1 是miR-28-5p的靶基因,姜黄素诱导miR-28-5p过表达可直接靶向BECN1 抑制自噬过程.
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