炎调方通过PD-1/PD-L1通路抑制脓毒症大鼠T淋巴细胞衰竭的实验研究
Experimental study on inhibition of T lymphocyte failure by Yantiao Formula through the PD-1/PD-L1 pathway in septic rats
摘要目的 研究炎调方对脓毒症大鼠T淋巴细胞及T淋巴细胞表面表面程序性死亡蛋白(PD-1)、程序性死亡蛋白配体(PD-L1)表达的影响.方法 SD大鼠(雄性)分为正常组、假手术组、模型组和炎调方组.盲肠结扎穿孔(CLP)制备脓毒症大鼠模型,于造模后 12、24、48、72 h采集外周血处死大鼠(每个时间点各 5 只大鼠),采用流式细胞分析法测定CD3+、CD4+、CD8+比例;双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定CD4+及CD8+表面PD-1、PD-L1 表达水平.结果 白介素-6(IL-6)在脓毒症模型组 12h分泌达到高峰后逐渐下降,降钙素原(PCT)在模型组 24h达到高峰后逐渐下降;炎调方组在 12h降低IL-6 的水平(P<0.05),24 h时明显降低IL-6、PCT的水平(P<0.01).模型组CD3+、CD4+、CD8+比例早期分泌开始减少,48 h分泌达最低点(P<0.01);炎调方组在 48h时可升高 CD3+、CD4+、CD8+比例,提高CD4+/CD8+的比值而具体调节T细胞活化和增殖的功能.模型组CD4+、CD8+表面PD-1、PD-L1 表达水平早期 24h即表达增多(P<0.01),72 h表达最多;炎调方组 24h时即可抑制PD-1、PD-L1 的表达水平而具体改善T细胞衰竭的作用.CD4+的比例与CD4+表面PD-1、PD-L1 的表达呈负相关(P<0.01);CD8+比例与CD8+表面PD-1、PD-L1 的表达呈负相关(P<0.01).结论 脓毒症早期 48h内即出现了T细胞活化和增殖的功能衰竭引起的T细胞免疫抑制.炎调方能在脓毒症早期改善T细胞活化和增殖的功能,其机制可能与抑制PD-1/P-L1 通路有关.
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