换一批MiR-199及TNF-α在人退变椎间盘髓核组织中的表达及生物学作用
Expression levels of miR-199 and TNF-α in the human degenerated intervertebral disc nucleus pulposus tissue and their biological effects
摘要目的 探讨退变的人椎间盘髓核组织中miR-199及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达变化及生物学作用.方法 收集人退变椎间盘及正常对照髓核组织标本各5例,高通量测序筛查2组样本中表达差异明显的微小RNA,ELISA方法检测TNF-α水平变化及RT-qPCR检测miR-199表达量变化;人髓核细胞株经体外培养后应用TNF-α(20 ng/mL)诱导建立体外细胞凋亡模型;miR-control及miR mimics-199转染至髓核细胞,然后应用TNF-α刺激,探讨miR-199的调控作用.结果 与正常髓核组织比较miR-199在退变髓核组织中表达降低,TNF-α表达明显升高(P＜0.05).随着TNF-α诱导时间的延长miR-199表达及髓核细胞增殖下降(P＜0.05),而乳酸脱氢酶(LDH)升高(P＜0.05).与正常组比较,TNF-α组细胞增殖能力下降(P＜0.05),细胞凋亡率升高(P＜0.05),凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、caspase-3 及 cleaved caspase-3)表达水平升高(P＜0.05);与 TNF-α 组比较,TNF-α+miR-199mimics 组则逆转上述现象,且LDH升高.结论 在退变髓核组织中miR-199表达降低,TNF-α表达升高;髓核细胞凋亡可由TNF-α诱导产生,且呈时间依赖性;TNF-α诱导的髓核细胞凋亡可通过上调miR-199表达而逆转,提示miR-199参与椎间盘退变的发病过程,可作为椎间盘退变的早期诊治标志物及治疗靶点.
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关键词
椎间盘退变微小RNATNF-α凋亡intervertebral disc degenerationmicroRNA(miRNA)tumor necrosis factor-αlpha(TNF-α)apoptosis
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1002-7386.2025.02.006
发布时间
2025-03-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
河北省自然科学基金精准医学联合基金项目（H2021206139）
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