血小板衍生生长因子-BB调节AKT信号通路抑制MC3T3-E1细胞衰老并促进其成骨分化
Platelet-derived growth factor-BB inhibits MC3T3-E1 cell senescence and promotes osteogenic differentiation by regulating the AKT signaling pathway
摘要目的 构建小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)衰老模型,通过检测细胞衰老和成骨分化相关指标,验证血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)对MC3T3-E1细胞衰老以及成骨分化的作用,并探索其机制.方法 使用H2O2诱导MC3T3-E1细胞衰老,并进行PDGF-BB干预.检测细胞衰老标志物包括细胞增殖、细胞衰老β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色阳性细胞数、活性氧(ROS)生成、周期蛋白依赖激酶抑制剂2A(P16)和周期蛋白依赖激酶抑制剂1A(P21)以及炎性相关因子白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)的mRNA表达水平和成骨分化相关指标.使用抑制剂MK-2206探索AKT信号通路.结果 与Control组相比,H2O2组细胞增殖减弱,SA-β-gal染色阳性细胞数、ROS生成增多,P16、P21、IL-6和IL-8的基因表达上调(P<0.05)以及成骨分化能力受损(P<0.05);H2O2+PDGF-BB组细胞的增殖能力、成骨分化能力高于H2O2组(P<0.05),SA-β-gal染色阳性细胞数、ROS生成、P16、P21、IL-6和IL-8基因表达水平低于H2O2组(P<0.05);H2O2+PDGF-BB+MK-2206组细胞的增殖能力、成骨分化能力低于H2O2+PDGF-BB组(P<0.05),SA-β-gal染色阳性细胞数、ROS生成、P16、IL-6和IL-8基因表达水平高于H2O2+PDGF-BB组(P<0.05).结论 PDGF-BB对抗小鼠MC3T3-E1细胞衰老并促进衰老细胞的成骨分化,该作用的发挥可能与AKT信号通路被再次激活有关.
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