疏风宣肺方和解表清里方体外干预甲型流感病毒H1N1诱导炎性细胞因子分泌作用的研究
Investigation of extraorgan intervention of combination of Shufeng -xuanfei formula and Jiebiao -qingli for-mula on the secretory action of influenza virus H1N1-induced inflammatory cytokines
摘要目的:研究疏风宣肺方和解表清里方对甲型流感病毒H1 N1感染的人肺腺癌上皮细胞(A549)中炎性细胞因子的影响。方法培养 A549,甲型流感病毒 H1N1感染 A549后,分为细胞对照组、H1V1感染组、奥司他韦对照组、疏风宣肺组及解表清里组。采用实时定量聚合酶链式反应(RT -PCR)和Western blotting 法检测各组细胞中炎症相关的白细胞介素(IL)1、肿瘤坏死因子α(TNF -α)、IL -6、IL -10、单核细胞趋化蛋白1(MCP -1)、调节活化正常 T 细胞表达和分泌的趋化因子(RANTES)的 mRNA 及蛋白表达的变化。结果基因芯片结果提示,与细胞对照组比较,H1N1感染组差异表达基因 Il1β、Thf、Ccl5、Il10、Il6、Ccl2明显上调。与 H1N1感染组比较,奥司他韦组、疏风宣肺组和解表清里组差异基因 Thf、Il1β、Ccl5、Il10、Il6、Ccl2表达显著下调。 RT -PCR 结果显示,与细胞对照组比较,H1N1感染组 IL -1、TNF -α、IL -6、IL-10、MCP -1、RANTES 的 mRNA 表达均显著升高(P <0.01)。与 H1N1感染组比较,疏风宣肺组 IL -1、TNF-α、IL -6、IL -10、MCP -1的 mRNA 表达均明显降低(P <0.01,P <0.05),解表清里组 IL -1、TNF -α、IL -6、MCP -1的 mRNA 表达均明显降低(P <0.01,P <0.05)。 Western blotting 结果显示,H1N1感染组 IL -1、TNF -α、IL -6、IL -10、MCP -1、RANTES 蛋白表达较细胞对照组显著升高(P <0.05);与 H1N1感染组比较,疏风宣肺组及解表清里组 IL -1、TNF -α、IL -6、IL -10、MCP -1、RANTES 蛋白表达均显著降低(P <0.05,P<0.01)。结论疏风宣肺方和解表清里方均可抑制流感病毒感染后炎性细胞因子 IL -1、TNF -α、IL -6、MCP -1的 mRNA 过表达及蛋白分泌,减轻炎症反应,并恢复机体免疫功能的稳定和平衡。
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