青藤碱对胶原诱导性关节炎小鼠滤泡辅助性T细胞的影响
Effect of sinomenine on follicular helper T cell in collagen-induced arthritis mice
摘要目的研究青藤碱对胶原诱导性关节炎 (CIA) 小鼠外周血滤泡辅助性T细胞 (Tfh) 的影响, 探讨青藤碱治疗类风湿关节炎的可能机制.方法35只DBA/1小鼠随机分为正常组 (5只), 模型组 (10只), 青藤碱组 (10只), 地塞米松组 (10只).青藤碱组予青藤碱溶液74 mg/ (kg·d), 地塞米松组予地塞米松0.88 mg/ (kg·2d), 正常组和模型组予0.9%氯化钠注射液10 m L/ (kg·d), 造模后1 d即实验第1 d, 各组小鼠均后肢肌肉注射给药, 连续用药58 d.实验第21 d开始, 计算各组小鼠关节炎指数.实验第59 d处死小鼠, 观察关节滑膜病理变化.收集眼眶血, 应用流式细胞仪测定小鼠Tfh细胞比例, 应用酶联免疫吸附法 (ELISA) 检测白细胞介素21 (IL-21) 水平, 应用实时免疫荧光定量聚合酶链式反应 (Real-time PCR) 检测脾脏组织B细胞淋巴瘤-6 (Bcl-6) mRNA水平, 应用蛋白免疫印迹法 (WB) 检测脾脏组织Bcl-6蛋白水平.结果与正常组比较, 模型组的关节炎指数、Tfh细胞比例和IL-21水平均升高 (P<0.01), 脾脏组织Bcl-6mRNA表达、Bcl-6蛋白水平增加 (P<0.01);与模型组比较, 青藤碱组和地塞米松组关节炎指数下降 (P<0.05, P<0.01), 青藤碱组Tfh细胞比例、IL-21水平、脾脏组织Bcl-6 mRNA表达、Bcl-6蛋白水平降低 (P<0.05, P<0.01), 地塞米松组Tfh细胞比例降低 (P<0.05), 脾脏组织Bcl-6 mRNA表达、Bcl-6蛋白水平比较差异均无统计学意义 (P>0.05).结论青藤碱能下调CIA小鼠Bcl-6 mRNA和Bcl-6蛋白的表达, 降低Tfh细胞比例, 抑制IL-21水平, 并改善小鼠的关节炎症状.
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