摘要目的 观察黄连碱(COP)调节Wnt蛋白(Wnt)/β-连环素(β-catenin)/T细胞因子 4(TCF-4)信号通路对肾癌细胞恶性生物学行为的影响.方法 用 1～100 μmol/L 的 COP 处理人肾癌细胞(ACHN),用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞活性,筛选最佳COP浓度.将生长至对数期的ACHN细胞进行随机分组,对照组、COP 低浓度组、COP中浓度组、COP高浓度组、COP高浓度+Wnt激活剂组(COP高浓度+LiCl组).采用 5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷(EdU)法、流式细胞术、划痕愈合法、Transwell实验分别检测细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭能力;蛋白免疫印迹法检测ACHN细胞细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、Bcl-2 相关X蛋白(Bax)、上皮间质转化相关蛋白[上皮钙黏蛋白(E-Cad-herin)、神经钙黏蛋白(N-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)]、Wnt/β-catenin/TCF-4 通路蛋白表达水平;小鼠移植瘤实验检测COP对肾癌肿瘤生长及通路蛋白表达的影响.结果 根据浓度筛选实验结果,选择COP浓度为 10、25、50 μmol/L作为后续实验浓度.与对照组比较,COP 低、中、高浓度组ACHN细胞EdU阳性率和Cyclin D1、N-Cadherin、Vimentin、Wnt3a、β-catenin、TCF-4 表达量、划痕愈合率、细胞侵袭数目均降低,细胞凋亡率、Bax、E-Cadherin表达水平均升高(P<0.05);与COP 高浓度组比较,COP 高浓度+LiCl组 EdU阳性率和 Cyclin D1、N-Cadherin、Vimentin、Wnt3a、β-catenin、TCF-4表达量、划痕愈合率、细胞侵袭数目均升高,细胞凋亡率、Bax、E-Cadherin表达水平均降低(P<0.05).通过小鼠移植瘤研究发现,COP组小鼠移植瘤的体积、质量较对照组降低,同时Wnt3a、β-catenin、TCF-4 蛋白表达水平均降低(P<0.05).结论 COP通过下调Wnt/β-catenin/TCF-4 信号通路抑制肾癌ACHN细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化过程,促进癌细胞凋亡.