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邻苯三酚自氧化法在SOD活性测定中的应用

Pyrogallol autoxidation and its application to SOD activity assay

摘要为了验证邻苯三酚自氧化法的准确性和实用性,对邻苯三酚在Tris-HCl和磷酸盐2种不同反应体系(缓冲液)中的自氧化产物进行UV-Vis吸收光谱扫描,确定其最适吸收峰;同时研究了tcv Cu,Zn-SOD(简称tcvSOD)和Bovine Cu,Zn-SOD(简称Bovine SOD)分别在2种缓冲液中对邻苯三酚自氧化反应的抑制模式.波长扫描显示,终浓度为0.225 mmol/L的邻苯三酚在50 mmol/L Tris-HCl pH 8.2缓冲液中于320 nm处30 s出现明显吸收峰,30 min吸收峰达到最高值;30 min后440 nm附近出现吸收峰;A320处的自氧化速率为0.139/min.同样浓度邻苯三酚在0.2 mol/L pH8.0磷酸缓冲液中除了A320的自氧化速率稍高(A320 0.152/min)外,其他性质与50 mmol/L Tris-HCl相同.tcvSOD和Bovine SOD在Tris-HC1缓冲液中对邻苯三酚自氧化反应的抑制作用较磷酸盐缓冲液为强.研究结果确认320 nm可作为检测邻苯三酚自氧化、SOD对其产生抑制及SOD活性间接测定的特定波长.

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