人食管癌Eca-109细胞膜蛋白的分离和纯化
Isolation and purification of membrane proteins of human esophageal carcinoma Eca-109 cell line
摘要目的:建立人食管癌Eca-109细胞系膜蛋白分离和初步纯化方法.方法:使用改良的Neville法提取细胞膜,在pH 6.3的条件下,用去垢剂Triton X-100和辛基β-葡糖苷把细胞膜上的蛋白溶解下来,以超滤法纯化膜蛋白并分组.结果:在pH 6.3的条件下,适当的去垢剂与膜蛋白质量之比使用去垢剂辛基β-葡糖苷时为6:1;使用Triton X-100时为2:1.超滤法将膜蛋白分为相对分子质量<3 000、3 000~10 000、<10 000、10 000~30 000、30 000~100 000、>100 000共6个组分.结论:获得适当的去垢剂与膜蛋白质量比,并获得了不同的膜蛋白组分,为进一步研究人食管癌Eca-109细胞肿瘤抗原奠定了基础.
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