换一批
换一批幽门螺杆菌 lpp20基因在食品级乳酸菌中的表达及免疫活性鉴定
Expression of Helicobacter pylori lpp20 gene in food-grade Lactococcus lactis and its immunoreactivity
摘要目的：构建分泌表达幽门螺杆菌 lpp20基因的重组乳酸乳球菌菌株，并鉴定其免疫活性，为研究安全高效的幽门螺杆菌口服疫苗奠定基础。方法：采用 PCR 法从幽门螺杆菌基因组 DNA 中扩增 lpp20基因，将 lpp20先与 T 载体（pMD19－T）连接，进而经双酶切与表达载体 pNZ8149－SPusp45连接，用电穿孔法将重组质粒转入食品级乳酸乳球菌菌株 NZ3900中，并用 Nisin 诱导 Lpp20表达，表达产物通过 Western blot 法鉴定免疫活性。结果：lpp20基因的 PCR 扩增产物大小约为540 bp，重组质粒的酶切、PCR 和测序鉴定结果符合预期；在菌体和培养基中均检出表达的 Lpp20蛋白，重组表达的 Lpp20蛋白相对分子质量约为20000，且具有与小鼠抗幽门螺杆菌血清反应的免疫活性。结论：成功构建了能够分泌表达幽门螺杆菌 Lpp20抗原的乳酸乳球菌菌株，该重组菌株在口服疫苗研究中具有应用潜力。
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关键词
乳酸菌lpp20基因幽门螺杆菌分泌表达食品级Lactococcus lactislpp20 geneHelicobacter pylorisecretary expressionfood-grade
分类号
R183
栏目名称
? 论著?
DOI
10.13705/j.issn.1671-6825.2016.04.011
发布时间
2016-08-08
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