换一批
换一批摘要目的:探讨MPTP对小鼠多巴胺能神经元细胞MN9D凋亡的影响及其可能机制.方法:MN9D细胞分别以0、1 μmol/L MPTP处理(对照组和MPTP组),或分别以pcDNA4、pcDNA4-BACE2 转染(对照组和BACE2 组),采用Western blot法检测BACE2、Cleaved Caspase-3 和内源性DSG2 蛋白的表达.MN9D细胞分为DSG2 组、DSG2 + BACE2 组和DSG2 +BACE2 +BACE抑制剂组,分别转染pENTER-DSG2 +pcDNA4、pENTER-DSG2 +pcDNA4-BACE2以及转染pENTER-DSG2 +pcDNA4-BACE2 后用1 μmol/L的BACE抑制剂处理,采用Western blot法检测DSG2 全长以及DSG2 各片段的表达.结果:与对照组相比,MPTP组中BACE2 及Cleaved Caspase-3 表达均上升(P<0.05);与对照组相比,BACE2 组Cleaved Caspase-3 表达增加,内源性DSG2 表达减少(P<0.05).与DSG2 组相比,DSG2 + BACE2 组中全长DSG2 表达下降,DSG2 羧基末端片段以及胞外DSG2 氨基末端片段均增多(P<0.05),而DSG2 + BACE2 +BACE抑制剂组中全长DSG2 及各DSG2 片段的表达与DSG2 组相似(P>0.05).结论:MPTP可通过上调BACE2 促进MN9D细胞凋亡,其机制可能与BACE2 对DSG2 的剪切有关;BACE2 和DSG2 可能参与了帕金森病的发病.
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