基于NLRP3/Caspase-1信号通路探讨柴芍实脾汤抗大鼠急性肝损伤的作用机制
Mechanism of Chaishao Shipi Decoction Treating Acute Liver Injury in Rats Based on NLRP3/Caspase-1 Signaling Pathway
摘要目的:观察柴芍实脾汤对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导的急性肝损伤(acute liver injury,ALI)大鼠肝功能的影响,并基于NOD样受体热蛋白结构域包含蛋白3(nod-like receptor,pyrin domain containing 3,NLRP3)/天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)信号通路探讨相关作用机制.方法:36 只SD大鼠随机分为对照组、模型组、柴芍实脾汤低剂量组(17g·kg-1)、中剂量组(34g·kg-1)、高剂量组(68g·kg-1)及葵花护肝片组(0.921 g·kg-1),每组6 只.各组连续给药2 周,每日1 次,对照组和模型组大鼠灌胃生理盐水.末次给药 2h后,除对照组外,其余大鼠灌胃CCl4 橄榄油溶液制备ALI模型.采用生化分析仪检测血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)含量,ELISA法检测血清白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)含量,HE 染色观察肝脏病理学形态,Masson 染色观察肝脏纤维化程度,Western blot 检测肝脏NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平.结果:与对照组比较,模型组大鼠肝脏质量、肝脏指数增加(P<0.05);与模型组比较,柴芍实脾汤各个剂量组和葵花护肝片组大鼠肝脏质量、肝脏指数降低(P<0.05).与对照组比较,模型组大鼠血清ALT、AST、IL-18、IL-1β含量升高(P<0.05);与模型组比较,柴芍实脾汤各个剂量组和葵花护肝片组大鼠血清 ALT、AST、IL-18、IL-1β含量降低(P<0.05).对照组大鼠肝小叶分布均匀,无明显纤维化;模型组大鼠肝细胞大面积脂质脱失,部分变性坏死,伴有胶原纤维沉积;与模型组比较,柴芍实脾汤各个剂量组和葵花护肝片组大鼠肝脏损伤明显改善,纤维化程度减轻.与对照组比较,模型组大鼠肝脏病理学评分和胶原沉积分数升高(P<0.05);与模型组比较,柴芍实脾汤各个剂量组和葵花护肝片组大鼠肝脏病理学评分、胶原沉积分数降低(P<0.05).与对照组比较,模型组大鼠肝脏NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平升高(P<0.05);与模型组比较,柴芍实脾汤各个剂量组和葵花护肝片组大鼠肝脏NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平降低(P<0.05).结论:柴芍实脾汤通过调节NLRP3/Caspase-1 信号通路发挥对ALI大鼠的肝脏保护作用.
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