摘要目的:本研究旨在探讨生慧汤通过Nrf2/HO-1信号通路抗氧化应激改善阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)认知障碍的作用机制.方法:从45只小鼠中随机抽取9只作为正常组,其余36只采用脑立体定位注射Aβ25-35寡聚体构建AD模型,模型小鼠分为模型组、生慧汤低剂量组、生慧汤高剂量组和多奈哌齐组,每组9只.(1)通过行为学实验评估学习记忆能力,利用免疫荧光技术检测小鼠海马β-淀粉样蛋白(amyloid β-protein,Aβ)沉积程度,并结合荧光探针法、酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA),探究生慧汤对AD氧化应激的影响.(2)通过网络药理学方法,筛选生慧汤的活性成分及相关靶点,并与AD、氧化应激的疾病靶点取交集,进而构建"生慧汤有效成分-靶点-AD-氧化应激"网络和蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,筛选生慧汤关键有效成分.此外,利用Metascape数据库和MCODE算法获取目标聚类模块靶点,并借助AutoDockTools软件对关键有效成分和聚类模块靶点进行分子模拟对接验证.(3)蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)实验评估对接结合能最佳分子的蛋白表达水平.结果:行为学实验结果表明,生慧汤可改善AD小鼠的学习记忆能力,减少Aβ沉积(P＜0.05),提升超氧化物歧化酶水平(P＜0.05),降低活性氧和丙二醛含量(P＜0.05).获得"AD-生慧汤-氧化应激"有效成分48个和交集靶点114个.其中,关键有效成分为山柰酚、β-谷甾醇、豆甾醇、去甲莨菪碱和四氢鸭脚木碱.有8个核心靶点参与了氧化应激反应、活性氮反应及低氧反应等重要生物过程,包括胱天蛋白酶3(Caspase-3,CASP3)、信号转导与转录激活因子1(signal transducer and activator of transcription1,STAT1)、过氧化物酶体增生激活受体γ(peroxisome proliferative activated receptor gamma,PPARG)、核因子红细胞系 2(nuclear factor erythroid 2,Nrf2)、细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)、血红素加氧酶 1(heme oxygenase-1,HO-1)、血管细胞黏附分子 1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM1)和胱天蛋白酶1(caspase-1,CASP1).分子对接结果显示,核心靶点HO-1与生慧汤关键有效成分结合效果最佳,WB实验验证生慧汤通过调控Nrf2和HO-1的表达水平,发挥抗氧化应激作用.结论:生慧汤可改善AD小鼠的学习记忆能力,减少Aβ生成,抑制氧化应激反应,其作用机制与调控Nrf2/HO-1通路中相关蛋白表达水平有关.