基于P2X2、M3和β3-AR受体探讨五苓散改善骶髓损伤后神经源性膀胱尿潴留的作用机制
Mechanism of Wuling Powder in Improving Neurogenic Bladder Urinary Retention in Rats After Sacral Spinal Cord Injury Based on P2X2,M3,and β3-AR Receptors
摘要目的:探讨五苓散对骶髓损伤后神经源性膀胱(neurogenic bladder,NB)大鼠模型尿潴留的改善作用及其潜在机制.方法:采用 Hassan Shaker 脊髓横断术建立膀胱逼尿肌无反射型 NB 大鼠模型,将大鼠分为假手术组,模型组,五苓散低、中、高剂量(1.5、3、6g·kg-1)组,每组10 只.连续灌胃20 d 后,采用 HE 染色观察大鼠膀胱组织病理形态,qPCR 与 Western blot 检测大鼠膀胱组织嘌呤受体亚型 2(purinergic receptor subtype 2,P2X2)、β 肾上腺素受体亚型 3(β-adrenergic receptor subtype 3,β3-AR)及毒蕈碱型受体亚型3(muscarinic receptor subtype 3,M3-R)的mRNA 与蛋白表达水平,ELISA 检测血清多巴胺(do-pamine,DA)含量,比色法检测血清三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)含量.结果:与假手术组比较,模型组大鼠 BBB 评分显著降低(P<0.01);膀胱组织 HE 染色显示模型组结缔组织排列疏松,伴炎症细胞浸润;膀胱组织 β3-AR mRNA 与蛋白表达水平显著升高,M3-R mRNA 与蛋白表达水平显著降低,P2X2 蛋白表达水平显著升高(P<0.01);血清 DA 与 ATP 含量均显著降低(P<0.05).与模型组比较,五苓散中、高剂量组大鼠 BBB 评分显著升高(P<0.01),膀胱组织病理异常程度减轻;膀胱组织 β3-AR mRNA 与蛋白表达水平显著降低,M3-R mRNA 与蛋白表达水平显著升高,P2X2 蛋白表达水平显著降低(P<0.05);血清 DA 与 ATP 含量均显著升高(P<0.05).结论:五苓散可能通过调控 P2X2、M3-R 和 β3-AR 的表达,促进神经功能和能量代谢的恢复,从而有效改善脊髓损伤后大鼠的尿潴留症状.
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