换一批
换一批argE基因的表达优化及Zn2+添加时间和浓度的影响机制分析
Expressing Optimization of argE Gene and Mechanism Analysis of Zn2+ Feeding Time and Its Concentration
摘要确定了目的基因argE在重组菌BL21(DE3)-pET22b-argE中的表达位置,研究了Zn2+对重组菌生长及表达产物活性的影响,并分析了影响机制. 结果表明,argE可在重组菌中高效表达,表达产物N-乙酰鸟氨酸脱酰基酶大多以不可溶的包涵体形式存在,只有少量为有活性的可溶性表达. 1.0 g/L的Mg2+对重组菌的生长及酶活有明显促进作用. Zn2+加入时机及加入量不同,影响结果也不同. 发酵起始加入Zn2+严重抑制菌的生长及酶活,而在1.0%乳糖诱导2.5 h后加入则可解除生长抑制并提高酶活. SDS-PAGE电泳及活力测定证实Zn2+参与形成酶的催化中心,对酶的表达量没有影响.
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