亚砷酸钠对HaCaT细胞中DNMT1、HDAC1基因mRNA转录及蛋白表达的影响

Effects of Sodium Arsenite on Transcription and Expression of DNA Methyltransferase 1 (DNMT1) and Histone Deacetylase 1 (HDAC1) Gene in HaCaT Cells

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摘要目的了解不同剂量的亚砷酸钠(NaAsO2)对人皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞)中DNA甲基转移酶1(DNMT1)、组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)基因mRNA转录和蛋白表达的影响.方法分别以0、3.13、6.25、12.5和25μmol/L NaAsO2溶液重复间隔处理HaCaT细胞72 h(NaAsO2处理24 h,隔天再次进行相同处理,共处理3次),以实时荧光定量PCR(Q-PCR)技术检测DNMT1及HDAC1基因的mRNA转录,以免疫印迹分析(western blotting)检测DNMT1及HDAC1蛋白表达.以人表皮鳞癌细胞株A431作为阳性对照.结果细胞经0、3.13、6.25、12.5和25 μmol/L NaAsO2溶液.处理后,DNMT1 mRNA转录相对表达量分别为0.65090±0.17405,0.93053±0.145 56,0.752 93±0.244 62,0.558 11±0.051 02和0.370 17±0.088 4,差异有统计学意义(F=6.539,P<0.05);HDAC1 mRNA转录相对表达量分别为2.021 80±0.179 57,1.496 98±0.107 55,1.303 24±0.152 08,1.037 75±0.204 88和0.816 74±0.153 12,差异有统计学意义(F=17.914,P<0.05).DNMT1蛋白相对表达量分别为0.000 87±0.000 10,0.026 04±0.002 63,0.283 19±0.072 62,0.842 61±0.082 39和1.579 87±0.200 83,差异有统计学意义(F=27.799,P<0.05);HDAC1蛋白相对表达量分别为0.034 65±0.012 03,0.273 65±0.012 02,0.634 90±0.239 76,0.775 03±0.126 51和1.126 16±0.167 52,差异有统计学意义(F=9.820,P<0.05).结论 DNMT1和HDAC1蛋白的高表达是砷致皮肤损害的重要分子事件,这为进一步应用其抑制剂探索砷中毒的防治提供了可能.