细胞外钙水平对奶牛中性粒细胞内钙影响特征研究

Study on the Characteristics of Extracellular Calcium Level's Effect on Intracellular Calcium of Dairy Cows

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摘要奶牛低钙血症是围产期奶牛高发的一种以钙代谢紊乱为主的疾病,易导致子宫内膜炎及乳房炎等炎性疾病的发生,给奶牛业带来了巨大的经济损失.中性粒细胞作为机体重要的免疫细胞,在抵御细菌和真菌感染的宿主防御中发挥关键作用.细胞内钙离子作为第二信使维持细胞正常的生理功能,参与中性粒细胞的形成、释放、粘附等多种生物学功能的调控.实验旨在探究不同浓度的氯化钙对奶牛中性粒细胞细胞内钙离子的影响.选择黑龙江省某牧场健康奶牛和低钙血症奶牛各5头,经尾静脉采血后利用牛中性粒细胞分离试剂盒分离中性粒细胞,流式细胞仪检测静息状态下中性粒细胞表面ORAI1蛋白表面丰度;不同浓度的氯化钙处理健康奶牛中性粒细胞12和18 h,流式细胞仪测定静息状态下中性粒细胞表面ORAI1蛋白表面丰度及细胞内钙离子浓度.结果显示,低钙血症奶牛ORAI1蛋白表面丰度显著低于健康奶牛;培养12 h后,对照组中性粒细胞ORAI1蛋白丰度显著低于0.2和0.6 mmol·L-1实验组,极显著低于1 mmol·L-1实验组;对照组中性粒细胞细胞内钙离子浓度显著低于0.2,0.6和1 mmol·L-1实验组.这些结果表明细胞外液钙离子能提高中性粒细胞细胞内钙离子浓度以及ORAI1丰度的表达.