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抗Ⅰ型鸭肝炎病毒单链抗体库的构建与筛选

Construction and screening of ScFv library against Duck hepatitis virus type Ⅰ

摘要为了构建和筛选抗Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ)单链抗体库,试验用Ⅰ型鸭肝炎疫苗免疫樱桃谷鸭,以分离的外周血淋巴细胞总RNA为模板,根据抗体保守区序列设计引物,通过RT-PCR技术扩增出鸭IgG轻链可变区和重链可变区基因,由Linker序列连接,用重叠延伸PCR(SOR-PCR)技术将其连接成单链抗体基因,将扩增的单链抗体基因导入pComb3XSS载体中构建抗DHV-Ⅰ噬菌体单链抗体库,并对该噬菌体单链抗体库进行 3 次吸附-洗脱-富集.结果表明:试验成功构建出库量为8.5×109pfu/mL的抗DHV-Ⅰ噬菌体单链抗体库,筛选出1 株亲和力较高的抗DHV-Ⅰ噬菌体单链抗体.说明试验成功构建了鸭源抗DHV-Ⅰ噬菌体单链抗体库,筛选出 1 株与DHV-Ⅰ亲和力良好的鸭源噬菌体单链抗体.

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分类号 S852.65S858.32
栏目名称
DOI 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2020.03.0907
发布时间 2023-11-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
基金项目
国家重点研发计划(2016YFD0500800)
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