牛病毒性腹泻病毒在MDBK细胞上培养增殖影响因素的研究
Study on the factors influencing the proliferation of Bovine viral diarrhea virus in MDBK cells
摘要为了确定牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)在牛肾细胞(Madin darby bo-vine kidey cell,MDBK细胞)上的培养增殖影响因素,试验通过优化接毒剂量、吸附时间、收毒时间、血清浓度、培养液pH值等参数,确定BVDV在MDBK细胞上增殖的最佳培养条件,并利用该培养条件增殖培养BVDV及进行免疫原性试验,研究其对犊牛的免疫原性.结果表明:BVDV在MDBK细胞上培养的最佳接毒量为毒种稀释1×103 倍,最佳吸附时间为 1 h,最佳收毒时间为接毒后 48 小时,最佳血清浓度为2%,最佳培养液pH值为7.2,应用最佳培养条件培养的3 批次培养物的病毒含量分别为1.0×106.88 TCID50/0.1 mL、1.0×106.83 TCID50/0.1 mL、1.0×106.88 TCID50/0.1 mL,利用该培养物制备的油乳剂灭活疫苗在免疫犊牛后第7 天即可产生BVDV中和抗体,至免疫后第 180 天中和抗体效价仍维持在较高水平,具有良好的免疫原性.说明通过优化培养条件确定了BVDV在MDBK细胞上的增殖培养影响因素,利用该培养条件增殖培养的BVDV的病毒液具有良好的免疫原性.
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