洋地黄毒苷对甲状腺乳头状癌细胞中NIS蛋白表达的影响
Effect of Digitoxin on the Expression of NIS Protein in Thyroid Papillary Carcinoma Cells
摘要目的:探讨洋地黄毒苷对甲状腺乳头状癌(Thyroid papillary carcinoma,PTC)细胞中钠-碘转运体(Sodium-Iodide Symporter,NIS)蛋白表达的影响.方法:配制不同浓度的洋地黄毒苷溶液,选择洋地黄毒苷溶液浓度为0.25 μmol/L、雷帕霉素作用浓度为50 μg/mL、3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)作用浓度为0.2 mmol/L进行后续实验.将甲状腺乳头状癌细胞株BC-PAP分为不做任何干预的空白对照(control)组、实验组为洋地黄毒苷(digitoxin)组、阳性对照组为雷帕霉素(rapamycin)组,阴性对照组为digitoxin+3-MA组,采用蛋白免疫印迹法检测各组细胞中NIS、微管相关蛋白 1 轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,MAP1LC 3)、BECLIN1自噬相关蛋白(Beclin 1 Autophagy Related Protein,Beclin-1)的表达,在透射电子显微镜下观察细胞自噬小体的形成.结果:蛋白免疫印迹法显示,digitoxin组的NIS、Beclin-1、MAP1LC 3相对表达量高于control组,差异均有统计学意义(P<0.01);rapamycin组的NIS、Beclin-1相对表达量高于control组,差异均有统计学意义(P<0.01)、MAP1LC 3蛋白相对表达量高于control组,差异有统计学意义(P<0.05);digitoxin 组的 NIS、Beclin-1、MAP1LC 3 相对表达量高于 rapamycin 组,差异均有统计学意义(P<0.01);digi-toxin+3-MA组的NIS、Beclin-1、MAP1LC 3相对表达量低于digitoxin组,差异均有统计学意义(P<0.01).在投射电子显微镜下见control组无自噬小体,digitoxin组和rapamycin组可见自噬小体,digitoxin+3-MA组未见自噬小体.结论:洋地黄毒苷可使PTC细胞中NIS的表达增加,其机制可能与诱发自噬有关.
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