摘要目的:构建一种抗新型冠状病毒受体结合域蛋白(RBD)的免疫磁珠,并对其纯化RBD蛋白效率以及纯化的RBD蛋白进行生物学活性评估.方法:分别将抗RBD抗体30G10、26D8及28D9与氨基化或羧基化纳米磁珠进行偶联,构建相应抗RBD免疫磁珠.将构建好的磁珠分别与含有过表达RBD蛋白的样品溶液进行孵育,以此通过蛋白免疫沉淀实验进行RBD蛋白的纯化.将纯化后的RBD蛋白免疫小鼠,利用酶联免疫法检测小鼠血清中抗体的含量.结果:28D9偶联的氨基化磁珠及26D8偶联的羧基化磁珠都能成功下拉 RBD蛋白,但28D9偶联的氨基化磁珠下拉的RBD蛋白量要明显比26D8偶联的羧基化磁珠多.另外,纯化得到的RBD蛋白具有显著的免疫原性活性.结论:研究成功构建了一种抗RBD免疫磁珠(28D9偶联的氨基化磁珠),并发现其纯化RBD蛋白的效率较高,且纯化得到的RBD蛋白具有显著的免疫原性.
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