circRNA MYLK基因干扰对胰腺癌PANC-1细胞线粒体膜电位、氧化损伤和微管形成的影响
Effects of circRNA MYLK Gene Interference on Mitochondrial Membrane Potential,Oxidative Damage and Formation of Microtubules in Pancreatic Cancer PANC-1 Cells
摘要目的 探讨circRNA肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MYLK)基因干扰对胰腺癌PANC-1细胞线粒体膜电位、氧化损伤和微管形成的影响.方法 将对数生长期PANC-1细胞分为空白对照组、shRNA-NC组和circMYLK-shRNA组.转染后,采用细胞克隆形成实验检测各组PANC-1细胞的生长.试剂盒检测各组细胞上清液中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平.流式细胞仪分析细胞线粒体膜电位.显微镜下观察各组细胞微管结节数.Western blot检测各组细胞Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)/B 细胞淋巴瘤 2 基因(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、原癌基因 c-Myc、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和波形蛋白(Vimentin)表达.结果 与shRNA-NC组相比,circMYLK-shRNA1组PANC-1细胞的克隆形成率、JC-1红色荧光所占百分比、微管结节数明显降低(P均<0.05);细胞上清中SOD水平明显降低,MDA水平明显升高(P均<0.05);细胞内Bax/Bcl-2蛋白表达明显升高(P<0.05),c-Myc、VEGF和Vimentin蛋白表达明显降低(P均<0.05).结论 circRNA MYLK基因沉默可以抑制PANC-1细胞增殖能力,降低PANC-1细胞的线粒体膜电位,诱导细胞氧化损伤,抑制微管的形成.
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