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表面展示猪圆环病毒2型衣壳蛋白的重组杆状病毒的构建

Construction of Recombinant Baculovirus Surface-Displayed the Capsid Protein of Porcine Circovirus Type 2

摘要利用PCR方法扩增猪圆环病毒2型核定位信号区缺失的Cap蛋白基因,将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1的gp64信号肽和gp64成熟蛋白之间.将此融合片段亚克隆到质粒pcDNA3.1(+),获得重组质粒pcDNA3.1-gp64-dCap.然后将含有CMV启动子,gp64及dCap的基因片段克隆到杆状病毒转移质粒pFastBac-V,得到重组质粒pFastBac-dCap-V.然后将此转化DH10Bac感受态细胞,获得的重组穿梭质粒Bacmid-dCap-V,经脂质体转染St9细胞,获得重组杆状病毒Ac-dCap-V.该重组病毒感染Sf9细胞后可以产生典型的细胞病变,转导哺乳动物细胞后经间接免疫荧光试验证明,该重组杆状病毒成功转导哺乳动物细胞并表达dCap蛋白.

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分类号 S852.65
DOI 10.3969/j.issn.1001-411X.2011.04.021
发布时间 2012-02-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
基金项目
863计划((2006AA10A205)) 教育部新世纪优秀人才支持计划((NCET-06-0752)) 国家自然科学青年基金((30800826)) 广东省博士启动基金((8451064201001131)) 农业微生物学重点实验室开发课题((20090010)) 华南农业大学校长基金((5500-K08240))
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