基于B646L、EP402R、MGF360/505基因的非洲猪瘟病毒ERA检测方法的建立
Development of ERA detection method for African swine fever virus based on B646L, EP402R and MGF360/505 genes
摘要[目的] 建立一种基于酶促重组酶扩增(Enzymatic recombinase amplification,ERA)技术的非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV) DNA快速检测方法. [方法] 参考ASFV B646L基因、EP402R基因和多基因家族成员MGF360/505基因保守序列,设计特异性的ERA探针和引物,经过反应条件的优化,建立42 ℃等温条件下检测ASFV DNA的ERA方法. [结果] ERA-ASFV-B646L、ERA-ASFV-EP402R和ERA-ASFV-MGF 3个检测方法分别在16、7和13 min内即可得出检测结果;特异性强,对阳性样品拷贝数的检测下限均为102 μL?1;与我国非洲猪瘟诊断技术标准中的方法对比,结果符合率为100%. [结论] 本研究建立的 ERA检测方法可以用于ASFV的快速检测,为流行病学调查和现场检测提供了一种快速有效的检测方法.
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