首页 > 农业科学与技术（英文版） > 斑马鱼不同发育时期血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)基因表达的实时定量PCR分析

斑马鱼不同发育时期血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)基因表达的实时定量PCR分析

Real-time Quantitative PCR Analysis of Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-2 (VEGFR-2) Expression at Zebrafish Different Developmental Stages

二维码有效期 120s

摘要[目的]探讨血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)基因在斑马鱼不同发育时期的表达.[方法]采用Trizol法分别提取12、24、48、72和96 h斑马鱼胚胎和仔鱼总RNA;再使用MMLV反转录酶将其反转录为cDNA;合成的cDNA用实时定量RT-PCR方法检测VEGFR-2基因的表达.实时定量RT-PCR扩增反应结束后,利用熔解曲线对扩增产物进行特异性分析.采用2-△△Ct法进行数据分析.[结果] VEGFR-2基因表达量在12～72 h呈上升趋势,在96 h时有所下降.12 h相对表达量最低,与其他发育期差异极显著(P <0.01),72 h相对表达量最高,与12、24和96 h差异极显著( P <0.01),与48 h差异显著(P <0.05).[结论] 斑马鱼血管发育至72 h达成熟阶段,血管发育成熟前,VEGFR-2基因表达水平逐步增长;血管发育成熟后,VEGFR-2基因表达水平下降.