高简并引物小温度范围不规则降落PCR在庞大基因家族扩增中的应用
Application of Abnormal Touchdown PCR with High Degeneracy Primer in Amplification of Large-Family Genes
摘要[目的]探讨了高简并性引物扩增庞大基因家族基因的特殊方法.[方法]采用常规高简并引物对鲤鱼基因组DNA分析进行了常规PCR扩增、常规降落PCR扩增以及优化后的小温度范围不规则跳跃降落PCR扩增.[结果]采用PCR仅得1条明显条带,得到的基因较少;采用常规降落PCR法仅得到弥散性扩增,无明显条带出现;而采用小温度范围的不规则跳跃降落PCR则得到了得到了3条明显条带和多个基因,扩增结果理想.[结论]为庞大基因家族扩增条件中的优化与选择提供了理论依据.
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