换一批
换一批猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒非结构蛋白nsp1α的表达及活性检测
Expression and Activity Detection of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Nonstructural Protein 1α
摘要为获得具有活性的猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒( PRRSV)非结构蛋白1α( nsp1α),以BJ-4 PRRSV nsp1α真核表达质粒pcDNA3.1-nsp1α为模板扩增nsp1α,克隆到原核表达载体pET -28a,1 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导含有重组质粒的大肠杆菌BL21(DE3)。 SDS–PAGE结果显示,nsp1α以包涵体形式高效表达,重组蛋白大小约为20 ku；Western blot结果显示,表达的重组蛋白能与小鼠抗His标签单克隆抗体反应；包涵体蛋白复性后,ELISA方法检测结果显示,重组蛋白能与1∶6400稀释的PRRSV阳性血清反应。表明成功表达了nsp1α蛋白,且表达的重组蛋白具有较好的免疫学活性。
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分类号
S855.3
栏目名称
畜牧? 兽医
DOI
10.15933/j.cnki.1004-3268.2015.01.028
发布时间
2015-01-28
基金项目
国家自然科学基金项目
河南省农业科学院科研发展专项资金项目
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