换一批
换一批NTG诱变筛选赖氨酸缺陷型大肠杆菌
Screening of Lysine Auxotroph Mutant of Escherichia coli by NTG Induced Mutagenesis
摘要为了获得产赖氨酸益生菌所需的指示菌株,以大肠杆菌(E.coli)野生型为出发菌株,用0.25 mg/mL的亚硝基胍(NTG)进行诱变,采用青霉素浓缩法淘汰野生型菌株,采用点植对照法在基本培养基(MM)和赖氨酸补充培养基([Lys])上对赖氨酸营养缺陷型(Lys-)E.coli进行初筛,再采用划线对照法在MM和[Lys]上对Lys-疑似菌株进行复检,[Lys]斜面5次传代后,采用划线对照法检测Lys-菌株遗传稳定性.结果表明,0.25 mg/mL NTG处理菌液40 min,对应的致死率为82.4％,经初筛和复检后获得4株Lys-菌株,其中L-3和L-5菌株经5次传代后仍为Lys-菌株,Lys-菌株的检出率为2.70％.
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