换一批
换一批肝片吸虫Ftn-1蛋白分子特征、抗原性及其抗体制备
Molecular Characterization,Antigenicity and Antibody Preparation of Ftn-1 Protein of Fasciola hepatica
摘要为研究肝片吸虫Ftn-1蛋白的免疫学特性,根据GenBank中已发表的Ftn-1基因序列设计特异性引物,以肝片吸虫总RNA为模板,进行Ftn-1基因的RT-PCR扩增,将扩增产物连接到pMD19-T载体中,筛选出阳性克隆后测序,分析其分子特征.将Ftn-1基因克隆入表达载体pET-32a( +)中,将其转化至感受态细胞E.coli BL21(DE3)中,IPTG诱导表达并获得纯化的重组蛋白Ftn-1,经SDS-PAGE检测后,进行Western blot和小鼠免疫试验,分析其抗原性.结果显示,成功克隆了肝片吸虫Ftn-1基因,其cDNA全长为477 bp,推测编码158个氨基酸,编码蛋白质分子的抗原表位区主要集中在第33—57、83—87、113—146位,为亲水性蛋白,无跨膜区和信号肽.经SDS-PAGE检测,重组蛋白Ftn-1分子质量约为33.5 ku,与预期大小相符;Western blot分析结果表明,重组蛋白Ftn-1可被肝片吸虫阳性血清特异性识别,证明具有良好的反应原性.小鼠免疫试验证实,重组蛋白Ftn-1具有良好的免疫原性.
更多相关知识
分类号
S855.9
栏目名称
畜牧·兽医
DOI
10.15933/j.cnki.1004-3268.2018.02.023
发布时间
2018-05-11
基金项目
国家十三五重点研发计划项目
国家公益性农业行业专项
- 浏览0
- 被引3
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
