换一批摘要为分析斜纹夜蛾(Spodoptera litura)保幼激素环氧水解酶(Juvenile hormone epoxide hydrolase,JHEH)基因在其生长发育过程中的功能,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增SlJHEH基因的开放阅读框,并进行原核表达.SlJHEH基因开放阅读框为1 389 bp,编码462个氨基酸,预测蛋白质分子质量为52 ku,等电点为8.68.氨基酸序列存在催化三联体Asp226、Glu402和His429氨基酸残基及阴氧离子洞Tyr297、Tyr372和HGWP花样结构氨基酸残基.系统发育树分析结果表明,Sl JHEH与棉铃虫(Helicoverpa armigera)JHEH亲缘关系最近,氨基酸序列同源性高达78％.将SlJHEH的编码区连接到原核表达载体p ET32a上,成功构建了重组载体pET32aSlJHEH,转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行诱导表达.对表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting检测,结果显示,斜纹夜蛾JHEH基因在大肠杆菌中得到高效且准确的表达.
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关键词
斜纹夜蛾保幼激素环氧水解酶克隆序列分析原核表达重组蛋白Spodoptera lituraJuvenile hormone epoxide hydrolaseCloningSequence analysisProkaryotic expressionRecombinant protein
分类号
S433.4
栏目名称
DOI
10.15933/j.cnki.1004-3268.2018.12.013
发布时间
2019-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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