换一批卡波氏肉瘤相关疱疹病毒vGPCR具有巯基化酪氨酸的氨基端的表达和纯化
Expression and Purification of the N-terminal of KSHV Encoded G-Protein Coupled Receptor Containing the Sulfotyrosines
摘要卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)编码的G-蛋白偶联受体(vGPCR)基因是一种癌基因,在KSHV致瘤过程中起着重要作用.前期工作揭示vGPCR的氨基端Y26和Y28两位酪氨酸的巯基化作用对其致瘤性至关重要.本研究将vGPCR的氨基端(1～49位氨基酸)以及其yydd突变体分别同鼠Fc片段有机连接并命名为wt-vG-N-mFc和yydd-vG-N-mFo.采用该两种重组质粒分别转染HEK293T细胞,重组融合蛋白分别从全细胞裂解液和细胞培养液中被纯化出来,并被考马斯亮蓝和印迹杂交鉴定.放射自显影表明wt-vG-N-mFc而非yydd-vG-N-mFc具有巯基化修饰作用.含有巯基化酪氨酸的vGPCR氨基端融合蛋白的成功表达和纯化为其将来在研究vGPCR的致瘤性和以vGPCR为靶定目标的临床治疗中的应用打下了基础.
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DOI
10.3969/j.issn.1000-2537.2011.06.014
发布时间
2012-04-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
the National Natural Science Foundation of China（(Grant 81171583 and 3000294)）
the Program of Excellent Talent in Hunan Normal University（(Grant ET31004)）
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