换一批
换一批番茄红素β-环化酶基因(LcyB)启动子调控LcyB RNAi双元载体构建
Construction of RNAi Binary Vector to Silence Lycopene β-cyclase Gene LcyB Driven by Native LcyB Promoter
摘要根据番茄基因组DNA序列信息设计引物进行PCR扩增了Micro-Tom中番茄红素β-环化酶(Lycopeneβ-cyclase,LcyB)基因起始密码子上游1 534 bp启动子区域序列(LcyBp),生物信息学分析表明,该启动子序列中存在TA-TA-盒、CAAT-盒、昼夜节律响应元件Circadian、光响应元件Box Ⅰ、真菌激发子响应元件Box-Wl、低温响应元件LTR、响应赤霉素的作用元件P-box、乙烯响应元件ERE、响应生长素的作用元件TGA-element等顺式作用元件.依据番茄LcyB基因序列,设计2对含有不同酶切位点的特异引物进行PCR扩增LcyB基因3'端特异的276 bp DNA片段,利用RNAi载体pKANNIBAL构建了“LcyB启动子-LcyB基因正义片段(Sense)-PDK内含子-LcyB基因反义片段(Antisense)-OCS终止子”的RNAi表达框,并将这一RNAi表达框插入植物双元表达载体pART27的NotⅠ位点,构建成本研究的LcyB启动子驱动的LcyB基因RNAi植物双元表达载体pART-LcyBp-RNAi-LcyB.为利用RNAi技术特异性敲除LcyB基因进而提高番茄果实中番茄红素含量奠定实验基础.
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关键词
番茄番茄红素β-环化酶(Lycopene β-cyclase,LcyB)启动子RNAi双元载体tomatoLycopene β-cyclase (LcyB)promoterRNAi binary vector
分类号
Q945.1
栏目名称
DOI
10.6054/j.jscnun.2016.06.002
发布时间
2016-10-12
基金项目
广东省科技计划项目（2013B020303003）；
广东省教育厅科技创新项目和创新强校专项工程项目（2013KJCX0104）；
广东省自然科学基金项目（2016A030313370）；
2015年度国家级大学生创新创业训练计划项目（201511347003）
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