慢病毒介导的 RNA 干扰沉默 MLF1IP 基在胆管癌 RBE 细胞中的表达
Lentivrus-mediated RNA interference of MLF1IP gene silencing in human cholangiocarcinoma cell line RBE
摘要目的:应用慢病毒介导的 RNA 干扰技术沉默胆管癌 RBE 细胞中人髓细胞白血病因子1相互作用蛋白(MLF1IP)基因的表达,探讨其对胆管癌细胞体外增殖的影响。方法:设计合成针对 MLF1IP 靶基因序列的 siRNA序列,进行重组慢病毒包装。与不含有 MLF1IP 基因 siRNA 序列的慢病毒分别转染胆管癌 RBE 细胞株。Real-time PCR 检测 MLF1IP 基因的 mRNA 表达,MTT 法检测细胞的增殖能力。结果:成功构建了 MLF1IP-shRNA 慢病毒质粒并进行慢病毒包装,Real-time PCR 显示实验组 MLF1IP 基因的 mRNA 相对表达量为0.15±0.02明显高于对照组为1.01±0.12。MTT 法检测实验组细胞的 OD 值对比对照组显著降低。结论:慢病毒介导的 RNA 干扰技术能有效沉默 RBE 细胞中 MLF1IP 基因的表达,并能明显抑制胆管癌细胞 RBE 的体外增殖能力。
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