芹菜素对HeLa细胞miR-342-3p及其靶基因FOXM1表达和自我更新的影响
Effects of Apigenin on Expressions of MiR-342-3p and its Target Gene FOXM1 and Self-Renewal in Cervical Cancer HeLa Cells
摘要目的:研究芹菜素(apigenin,API)是否通过上调miR-342-3p下调FOXM1表达水平,从而抑制宫颈癌HeLa细胞自我更新.方法:miR-342-3p抑制物、过表达FOXM1、亚细胞毒浓度API(1、3、10μM)处理或API(10 μM)分别联合miR-342-3p抑制物或过表达FOXM1处理HeLa细胞.球形成法测定自我更新能力.实时定量PCR分析miRNAs和mRNA表达水平.蛋白免疫印迹分析蛋白表达水平.荧光素酶报告基因实验验证miR-342-3p是否直接靶向FOXM1.裸鼠异种移植瘤模型评估API对HeLa源性球形成细胞体内生长的作用.结果:亚细胞毒性的API(1、3、10μM)以浓度依赖方式降低HeLa细胞球形成率[(32.70±2.48)%vs.(23.67±2.14)%、(16.50±1.66)%、(11.52±1.06)%,均P<0.05],下调CD49f和Sox2 蛋白表达水平,伴随提高miR-342-3p水平和降低FoxM1蛋白表达水平.此外,miR-342-3p抑制物或过表达FOXM1转染拮抗API的上述效应.口服API(50和100 mg/kg)抑制HeLa源性球形成细胞移植瘤生长[瘤重(0.66±0.11)g vs.(0.33±0.03)g、(0.17±0.02)g,均P<0.05].荧光素酶报告基因实验证实miR-342-3p直接靶向FOXM1.结论:API经上调miR-342-3p下调靶基因FOXM1表达水平进而抑制宫颈癌HeLa细胞自我更新.
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