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猫疱疹病毒Ⅰ型荧光定量聚合酶链式反应检测方法的建立

Establishment of a fluorescence quantitative polymerase chain reaction detection method for Feline Herpesvirus-1

摘要研究旨在建立实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测猫疱疹病毒Ⅰ型(Feline herpesvirus type Ⅰ,FHV-1)的方法,用于检测临床上猫的上呼吸道传染病样本.据GenBank已发表的猫疱疹病毒的gE基因序列的保守区域设计并合成一对特异性引物及探针,建立FHV-1的实时荧光定量PCR检测方法,对此方法进行特异性、灵敏度及重复性的验证,并对广东佛山某流浪猫基地猫疱疹病毒的流行情况进行调查,即对该基地的94份临床样品进行检测.结果表明:研究成功建立了 FHV-1实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法,此方法特异性强,与大多流行的犬猫病毒均未出现交叉反应;敏感性高,最低检出限为10 copies·μL-1;重复性好,批内变异系数为0.29%~0.71%,批间变异系数为0.88%~1.38%.应用此方法在94份临床样品中检出28份FHV-1核酸阳性样品.综上所述,研究建立的FHV-1荧光定量聚合酶链式反应方法具有较好的特异性、敏感性和重复性,为临床上FHV-1的快速检测提供了可行的解决方案.

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作者 陆媛倩 [1] 姜骏飞 [2] 程松 [3] 郑晓峰 [1] 李丕顺 [1] 孙相鑫 [2] 学术成果认领
作者单位 湖南农业大学动物医学院,湖南长沙 410128 [1] 壹宏基因(深圳)有限公司,广东深圳 518000 [2] 朴歌中农董军实验室检测技术(广州)有限公司,广东广州 510000 [3]
分类号 S852.659.1S858.293
栏目名称 试验研究
DOI 10.3969/j.issn.1006-4907.2024.01.012
发布时间 2024-03-14
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