摘要目的:研究抗冻缓冲液(anti-freeze buffer, AFB)对冰冻切片的长期保存作用.方法:4只12~15月龄的雌性C57BL/6NIA小鼠常规灌注取脑,50 μm冰冻切片,将切片于-20℃保存于抗冻缓冲液中,分别于切片的当日、切片后3个月、6个月和12个月, 行β-NADPH酶组织化学和GFAP免疫组织化学染色. 结果: 于-20℃冰箱保存在AFB内的冰冻切片,至6个月时,β-NADPH 酶组织化学显示的含一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS) 的神经元和毛细血管与新鲜标本没有区别;至12个月时,GFAP免疫组织化学染色显示的星形胶质细胞与新鲜标本没有区别.结论: AFB可较长时间保存组织切片的抗原成份和酶活性,是形态学研究领域较好的保存冰冻切片的方法.
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