HSF1调控的炎症相关基因的筛选及SOCS3基因的实验验证
Screen of inflammatory genes regulated by heat shock factor 1and corroboration with SOCS3 gene
摘要目的:筛选热休克因子1(HSF1)调控的炎症相关基因,初步探讨HSF1对下游基因的调控作用.方法:采用HSF1基因敲除小鼠,制备内毒素腹腔注射以及热休克反应后再给予内毒素腹腔注射的内毒素血症模型,分别抽提HSF1缺失突变纯合子和HSF1野生型小鼠肺组织总RNA,用微阵列进行筛选;用转录元件搜索软件分析差异表达基因的启动子区;选取启动子区含有热休克元件的基因:细胞因子信号转导抑制子3(SOCS3),采用热休克反应(HSR)和HSF1过表达的RAW264.7巨噬细胞给予内毒素刺激,抽提总RNA进行RT-PCR, Northern印迹实验,观察HSR和HSF1过表达对内毒素诱导的SOCS3基因表达的影响.结果:用微阵列的方法筛选到HSF1可能抑制表达的炎症介质基因15个,其中9个基因的启动子区含有热休克元件;HSF1可能促进表达的炎症介质基因11个,其中8个基因的启动子区含有热休克元件;HSR和HSF1过表达可明显抑制小鼠RAW264.7巨噬细胞内毒素诱导的SOCS3 mRNA的表达.结论:HSF1可抑制炎症介质SOCS3 mRNA的表达.
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