换一批HSF1基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞的永生化
Immortalization of embryonic fibroblasts in heat shock transcription factor 1 knockout mouse
摘要目的:建立HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维永生化细胞系,为HSF1的功能研究提供实验模型.方法:用脂质体介导的基因转染法将pSV3neo质粒导入HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维细胞,经G418筛选,抗性克隆扩大培养,建立永生化细胞系;用PCR检测两种细胞株中目的基因的整合,用RT-PCR法鉴定SV40 T基因在转染细胞中的表达;用Western blot检测所建细胞株的诱导型热休克蛋白70的表达情况.结果:有3个细胞克隆已扩大培养稳定传代达6个月,经鉴定SV40 T抗原已整合到两种细胞中且稳定表达, HSF1-/-胚胎成纤维细胞热休克蛋白70的诱导表达消失.结论:成功建立永生化HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维细胞.
更多相关知识
分类号
Q813.2（细胞工程）
栏目名称
DOI
10.3321/j.issn:1672-7347.2006.02.004
发布时间
2006-06-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
中国科学院项目（非规范项目）（30330280）
中国科学院项目（非规范项目）（30371382）
- 浏览248
- 被引6
- 下载9
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
