换一批5-杂氮胞苷对成人T淋巴细胞穿孔素基因启动子区域甲基化水平的影响
Effects of 5-azaC on methylation pattern of the perforin promoter of the perforin gene in normal human T cells
摘要目的:研究DNA低甲基化对穿孔素基因mRNA和蛋白表达的影响.方法:密度梯度离心分离正常成人的外周血淋巴细胞,磁珠分离CD4和CD8细胞后进行细胞培养,DNA甲基化抑制剂5-杂氮胞苷(5-azaC)处理.分别提取DNA、RNA和蛋白质.亚硫酸氢钠处理DNA,巢式PCR进行扩增、转化入大肠杆菌,挑取克隆测序.实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测穿孔素mRNA的表达,Western印迹检测穿孔素蛋白量的变化.结果:5-azaC处理后的CD4细胞和CD8细胞穿孔素mRNA和蛋白表达显著高于未处理的CD4和CD8细胞组(P＜0.05).测序结果显示5-azaC处理后的CD4细胞和CD8细胞DNA穿孔素启动子区域的甲基化水平降低,与未处理的CD4和CD8细胞组比较差异有统计学意义(P＜0-05).结论:5-azaC处理后CD4和CD8细胞穿孔素mRNA的表达和蛋白的表达都有显著的增高,这种增高与CD4和CD8细胞穿孔素基因启动子区域出现的低甲基化有关.
更多相关知识
栏目名称
DOI
10.3321/j.issn:1672-7347.2006.06.009
发布时间
2007-02-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30371297）
- 浏览191
- 被引4
- 下载26
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
