无排卵性功能失调性子宫出血患者血清标志物的筛选、鉴定及其在月经血中的表达
Screening and identification of serum biomarker of anovulatory dysfunctional uterine bleeding and its expression in the menses
摘要目的:筛选并鉴定无排卵性功能失调性子宫出血(anovulatory dysfunctional uterine bleeding,ADUB)患者血清中的蛋白标志物,并检测被筛选蛋白标志物在ADUB患者月经血中的表达,探讨其与ADUB的相关性.方法:采集128例ADUB患者、93例月经正常妇女(对照组)的血液标本,分离血清,同时收集她们的月经血,分离上清.应用CM10蛋白芯片进行蛋白质检测,采用Biomarker WizardTM3.2软件分析检测结果.应用Tricine-SDS-PAGE胶分离、质谱鉴定和免疫共沉淀对检测到有差异的蛋白质峰进行蛋白质鉴定.然后采用ELISA,RT-PCR和Western印迹检测被筛选标志蛋白在ADUB患者月经血上清中的表达.结果:筛选到5个有差异的蛋白质峰,其中ADUB患者组在11.80 km/z的蛋白质峰强度值明显大于对照组(P<0.05),在13.59 km/z的蛋白质峰强度值明显低于对照组(P<0.05),两组在蛋白质峰为13.79,13.85和14.20 km/z的强度值差异没有统计学意义(P>0.05).11.80 km/z的蛋白质峰被鉴定为血清淀粉样蛋白A(SAA),13.59 km/z的蛋白质峰被鉴定为血管内皮细胞生长因子(VEGF).在ADUB患者月经血上清中,SAA表达显著高于对照组(P<0.05),而VEGF的表达明显低于对照组(P<0.05).结论:成功筛选和鉴定出与ADUB相关的两个血清蛋白标志物SAA和VEGF,ADUB患者SAA表达上调,而VEGF表达下调,这是ADUB病因或疾病发生结果还有待进一步证实.
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