摘要目的:通过观察高糖环境下,醛固酮(aldosterone, Aldo)及其拮抗剂安体舒通(spironolactone,SP)对大鼠肾小管上皮细胞(normal rat kidney epithelial cell,NRK-52E)转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响,探讨Aldo及SP在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾保护作用中的机制.方法:用无血清DMEM(Dulbecco's modification of Eagle's medium Dulbecco)同步化培养NRK-52E细胞系12 h后分为6组.LG组:采用低糖(1 000 mg/L) DMEM;HG组:采用高糖(4 500 mg/L)DMEM培养;10 nmol/L Aldo组、50 nmol/L Aldo组、100 nmol/L Aldo组:分别采用高糖DMEM加10,50,100 nmol/L Aldo培养;SP组采用高糖(4 500 mg/L)DMEM加10~(-7) mol/L SP培养.采用细胞免疫化学、RT-PCR和Western免疫印迹方法检测各组细胞E-cadherin和α-SMA mRNA的表达情况.结果:RT-PCR结果表明,与LG组比较,HG组E-cadherin mRNA表达明显降低(P＜0.01),α-SMA mRNA表达明显升高(P＜0.05);50 nmol/L Aldo组、100 nmol/L Aldo组E-cadherin mRNA表达明显低于高糖组,而α-SMA mRNA表达明显高于高糖组(P＜0.05),两者与Aldo呈浓度依赖关系(r=-0.70,P＜0.05;r=0.67, P＜0.05);SP组E-cadherin mRNA明显高于HG组,而α-SMA mRNA表达低于HG组(P＜0.01).细胞免疫化学和Western免疫印迹检测表明,与低糖组比较,HG组E-cadherin蛋白表达明显减低,而α-SMA表达明显升高(P＜0.01);10 nmol/L Aldo组、50 nmol/L Aldo组、100 nmol/L Aldo组E-cadherin蛋白表达明显低于HG组,而α-SMA蛋白表达明显高于HG组(P＜0.05),与Aldo呈浓度依赖关系(r=-0.83,P＜0.05;r=0.81, P＜0.05);而SP组E-cadherin蛋白表达明显高于高糖组,α-SMA蛋白则明显低于HG组(P＜0.05).结论:Aldo能促进高糖环境下肾小管上皮细胞EMT的发生,致DN肾间质纤维化,而使用SP可抑制高糖诱导肾小管上皮细胞的EMT,这可能是其阻遏肾间质纤维化的重要机制.