换一批用抗HCV多抗从随机12肽库中筛选抗原表位
Biopanning of HCV antigen epitopes from a random 12-peptide library by anti-hepatitis C virus polyclonal antibody
摘要目的:用丙型肝炎患者血清中抗丙型肝炎病毒(HCV)抗体从噬菌体随机12肽库中筛选HCV抗原表位.方法:将丙型肝炎患者血清混合,提取纯化的IgG作为固相配基筛选噬菌体随机12肽库,按吸附-洗脱-扩增的淘洗过程进行3轮筛选,随机挑取噬菌体克隆用ELISA法检测其特异性,对4个克隆进行测序.并用ELISA法检测噬菌体克隆的诊断价值.结果:3轮筛选的投入产出比逐轮升高,回收率从(4.6×10~(-4))%增加到(5.3×10~(-2))%,具有良好的富集效果.对从第3轮洗脱物中挑选出的18个克隆进行结合试验,发现所挑的克隆与丙型肝炎患者的多克隆抗体有较强的结合力.其中4个克隆测序显示为同一克隆(命名为C1),其外源插入肽为GSMSPYVRWYTP.用C1检测20例丙型肝炎患者血清的检出率为85.0%.结论:成功地用噬菌体12肽库对丙型肝炎患者血清进行了模拟肽筛选,且得到的模拟肽分子C1具有一定的诊断价值.
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